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牛血清白蛋白,牛血清白蛋白的用途

来源:连笔字网 2024-01-01 08:16:48 作者:连笔君

牛血清蛋白的用途介绍

1、生化研究、遗传工程和医药研究
2、医药保健食品、调味品
3、维持渗透压、pH缓冲、载体作用
生产方法
以牛血为原料分离出血清,用硫酸铵分级沉淀后,经辛酸处理精制而得。
贮存方法
每10g加100ml水进行溶解,或用 PBS溶解也可,视用途而决定。然后分装成小支。若不使用防腐剂可贮存在零下20或30摄氏度的恒温柜中,若使用防腐剂(如0.1%叠氮化钠)则可贮存在零上4摄氏度的环境下。一般可存放数月不变质。防腐剂可能对牛血清白蛋白的效果造成影响,应慎用。

牛血清白蛋白用途是什么?

1、在PCR体系中有助于Taq酶的稳定性及活性,可以提高PCR的效率。
2、ELISA中也常常用到,比如封闭液,样本稀释液,酶结合物稀释液都可以用BSA。
3、生化研究,遗传工程和药物研究。
4、血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用,在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。
参考爱必信absin

血清白蛋白有何作用

肝脏在蛋白质代谢过程中起重要作用,血浆内主要的蛋白质几乎全部由肝脏制造。肝脏合成的蛋白质主要为白蛋白,大部分球蛋白也由肝脏产生。肝脏尚能合成酶蛋白和凝血因子,如纤维蛋白质,凝血酶原、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ 因子等。血清蛋白测定主要包括总蛋白、白蛋白、球蛋白和白/球比值。其正常值为:总蛋白 60-80/L、白蛋白35-5og/L、球蛋白25-40g/L、白/球比值为1.5-2.5。白蛋白减少,白/球比值降低,甚至颠倒,是肝硬化的特征。但在代偿良好的肝硬化患者,即使已出现明显增高(球蛋白血症),白蛋白的减少也往往属轻度,而当肝硬化患者已届失代偿期时,白蛋白即明显减少。测定血清总蛋白及白蛋白浓度,可作为判定慢性肝病患者预后的良好指标。肝硬化病人如总蛋白低于60g/L,白蛋白低于30g/L,提示预后欠佳。
这样可以么?

测检测限用的5%牛血清白蛋白溶液如何配制?

每5g加100ml水.还是用PBS溶解也可以,看你的用途.按一周内能用完的分量,分装成小支放在负20或负30度冰箱应该起码可以放好几个月.
不是冷冻保存的话,如果想放4度冰箱放久一点,则需要加防腐剂,比如可以用0.1% NaN3 (sodium azide) 也要看你的用途,有些实验会受防腐剂影响.

牛血清蛋白的BSA作用

BSA一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中,因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保护”或“载体”作用,不少酶类添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不会受到什么影响。对多数底物DNA而言,BSA可以使酶切更完全,并可实现重复切割。在37℃,酶切反应超过1h时,BSA可以使酶更加稳定,因为在不含BSA的反应缓冲液中,许多限制性内切酶在37℃下只能存活1020min甚至更短的时间。而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质。
1.BSA是酶的稳定剂,防止酶的分解和非特异性吸附;
2.BSA能减轻有些酶的变性,能减轻有些不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性,至于作用机理还不明确,可能是因为它结构中有17个二硫键和一个巯基,巯基的化学反应很活泼,二硫键有抗氧化还原的作用,因此可与多种阳离子、阴离子和小分子结合;
3.BSA能防止酶吸附到管壁而损失。

牛血清蛋白的牛血清蛋白介绍

牛血清白蛋白的相对分子质量为10的4次方这个级别,它不是一定的,而是多聚物的,有的地方测试数据为70 000,这一数据是在做PCR的时候使用的数据。
牛血清白蛋白是血液中的主要成分(38g/100ml),分子量68kD,等电点4.8,含氮量16%,含糖量0.08%,仅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。
牛血清蛋白溶液可以作为测量蛋白质含量的标准曲线用。
一般买回来的牛血清蛋白是细小片状的乳白色粉末。牛的血清蛋白也以铁为基本原料。
用途
1、特纯级牛血清蛋白
用途:用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂,生化试验等。
性状:淡黄色干燥粉末
2、无脂肪酸牛血清蛋白
用途:用作酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂,尤其适用于容易受脂肪酸影响的产品和试验。
性状:淡黄色干燥粉末
3、无蛋白酶牛血清蛋白
用途:用于酶标、金标等诊断试剂的封闭剂、保护剂,尤其适合血液脂类的诊断试验、脂类诊断试剂及对纯度要求高的产品。
性状:淡黄色干燥粉末
4、细胞培养级牛血清蛋白
用途:无血清培养基的蛋白添加剂,供细胞培养使用。
性状:淡黄色干燥粉末白蛋白
测定
标准曲线
一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术 。
测定方法
1. 凯氏定氮法
2. 双缩脲法
3. Folin-酚试剂法
4. 紫外吸收法
5. 考马斯亮蓝法
标准曲线制作
试剂
1. 考马斯亮蓝试剂:
考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85% H3PO4,用蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G—250,4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)H3PO4。
2. 标准蛋白质溶液:
纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。
器材
1. 722S型分光光度计使用及原理。
2. 移液管使用。
制作步骤
试管编号 0 1 2 3 4 5 6
100ug/ml标准蛋白(ml) 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
0.15mol/L NaCl (ml) 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4
考马斯亮蓝试剂 (ml) 5 5 5 5 5 5 5
摇匀,1h内以1号管为空白对照,在595nm处比色
3、以A595nm为纵坐标,标准蛋白含量为横坐标(六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug),在坐标轴上绘制标准曲线。
(1)、利用标准曲线查出回归方程。
(2)、用公式计算回归方程。
(3)、或用origin作图 ,测出回归线性方程。即A595nm=a×X( )+6
一般相关系数应过0.999以上,至少2个9以上。
(4)、绘图时近两使点在一条直线上,在直线上的点应该在直线两侧。
含量的测定
样品即所测蛋白质含量样品(含量应处理在所测范围内),依照操作步骤1操作,测出样品的A595nm,然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。
一般被测样品的A595nm值在0.1—0.05之间,所以上述样品如果A595nm值太大,可以稀释后再测A595nm值,然后再计算。
注意事项
1. 玻璃仪器要洗涤干净。
2. 取量要准确。
3. 玻璃仪器要干燥,避免温度变化。
4. 对照:用被测物质以外的物质作空白对照。

牛血清的用途

牛血清白蛋白溶液可以做透射电镜,一般来说蛋白质用磷钨酸染出来的效果比较好.要注意的就是支持膜最好用低噪声的碳膜,再有染色剂的PH最好不要超过7.0。牛血清白蛋白我没做过,如果在支持膜上展不成单层的话,可以试试把样品和染液混合后再滴样

0.5mg/ml牛血清白蛋白溶液如何配制?

您好! 0.5mg/ml牛血清白蛋白溶液,换算成0.5g/1000ml。也就是称取0.5g牛血清白蛋白溶于1000ml的纯化水,分装后-20℃保存既可。如果没有0.5g的牛血清白蛋白,那您就用千分之一或者万分之一天平称吧。

百度教育团队【海纳百川团】为您解答。
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